Abstract The objective of the study was to evaluate the growth of B. vulgaris seedlings by incorporating five doses of sewage sludge (0, 10, 30, 50, and 70%) into the substrate, with three types of propagules. The design used was completely randomized (DIC), with 30 replicates per treatment. At 30 and 90 days, the parameters were measured: height, number of shoots, and the dry mass of the roots and aerial part. The means were compared by the Scott-Knott test. It was found that the incorporation of sewage sludge was not detrimental to the growth and development of the seedlings. Concerning the three types of propagules, the highlight was P1, which was more promising in the seedling production via cuttings. The most indicated sewage sludge dosage is the incorporation of 30% since it showed higher growth of seedlings. With dry mass, from the aerial part, the highlight was the propagulum P2, followed by P1. Root dry mass values were low in all treatments evaluated, suggesting the need for a longer evaluation time in the development and establishment of bamboo seedlings in a nursery.

Resumo O objetivo do trabalho foi avaliar o crescimento de mudas de B. vulgaris através da incorporação cinco doses de lodo de esgoto (0, 10, 30, 50 e 70%) ao substrato, com três tipos de propágulos. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado (DIC), com 30 repetições por tratamento. Aos 30 e 90 dias foram mensurados os parámetros: altura, número de brotos, e a massa seca das raízes e parte aérea. As médias foram comparadas pelo teste Scott-Knott. Verificou-se que a incorporação de lodo de esgoto não foi prejudicial ao crescimento e desenvolvimento das mudas. Em relação aos três tipos de propágulos o destaque foi P1, que se mostrou mais promissor à produção de mudas via estaquia. Para a dosagem de lodo de esgoto mais indicada é a incorporação de 30%, uma vez que apresentou maior crescimento das mudas. Em relação a massa seca, da parte aérea o destaque foi o propágulo P2, seguido de P1. Já os valores da massa seca de raiz foram baixos em todos os tratamentos avaliados, o que sugere a necessidade de um maior tempo de avaliação no desenvolvimento e estabelecimento das mudas de bambu em viveiro.

Abstract Anatomical and histochemical studies were carried out during the somatic embryogenesis of Syagrus oleracea (Mart.) Becc. from immature inflorescences. Immature rachillas were inoculated on Murashige and Skoog medium with 4.52 μM 4-amino-3,5,6-trichloropicolinic acid (Picloram) and 2,4-diclorophenoxyacetic acid. Auxin concentrations were gradually reduced for the formation of somatic embryos, while for plantlet regeneration, embryos were inoculated on a medium without growth regulator. After 270 days, two types of embryogenic calluses were observed in explants under the effect of Picloram: nodular, with a smooth surface and those without definite shape, with an irregular surface, both presenting a meristematic zone with polysaccharide content. Callus progression to the differentiation stage allowed for the conversion of somatic embryos, some with a well-defined protoderm and procambial bundles. The histochemical analysis of the somatic embryos did not identify the presence of polysaccharide and protein reserves, which emphasizes the necessity for optimization of the maturation conditions.

RESUMO Durante a multiplicação in vitro de bambu, é rotineiro ocorrer a formação de agregados de brotos. Uma vez individualizados, eles podem render maior número de mudas do que se plantados agrupados. Objetivou-se avaliar o efeito da relação entre a altura e o número de brotos iniciais em mudas de bambu micropropagadas na sobrevivência e desenvolvimento das plantas, durante a pré-aclimatização. Brotações de Guadua aff. chaparensis, após sucessivos subcultivos de multiplicação in vitro, foram classificadas em três classes de altura (2,5-5,0 cm; 5,1-10.0 cm; 10,1-15,0 cm) e número de brotos agregados (um broto por planta/muda com haste única, dois e três brotos por muda) e pré-aclimatizadas em composição de substrato comercial e areia lavada. Foram avaliados a sobrevivência, altura, número de novos brotos e raízes, massa fresca e seca da parte aérea e raízes. Em mudas provenientes de micropropagação, a altura das plantas não influencia nas taxas de sobrevivência, podendo ser aclimatizadas, preferencialmente, com alturas entre 5,0 cm e 15,0 cm, com taxas de sobrevivência de até 97 %. Mudas com altura superior a 5,1 cm e compostas por 2 ou 3 brotos iniciais apresentam maior vigor e crescimento ex vitro, fato comprovado pelos maiores valores obtidos em relação à altura e emissão de novos brotos e raízes, bem como maior acúmulo de biomassa fresca e seca.

ABSTRACT During the in vitro multiplication of bamboo plantlets, it is common the formation of shoots aggregates. Once individualized, these can yield a greater number of plantlets than if planted in clusters. This study aimed to evaluate the effect of the relationship between height and number of initial shoots in micropropagated bamboo plantlets on the survival and development of plants, during the pre-acclimatization stage. Guadua aff. chaparensis shoots, after successive subcultures of in vitro multiplication, were classified into three height classes (2.5-5.0 cm; 5.1-10.0 cm; 10.1-15.0 cm) and number of aggregate shoots (one shoot per plantlet/single-stem plantlet, two and three shoots per plantlet) and pre-acclimatized in a commercial substrate composition plus washed sand. The plantlets were evaluated for survival, height, number of new shoots and roots, shoot and root fresh and dry mass. In plantlets from micropropagation, the plant height does not influence the survival rates, being acclimatized preferably at heights between 5.0 cm and 15.0 cm, with survival rates of up to 97 %. Plantlets with height starting at 5.1 cm and composed of 2 or 3 initial shoots show a greater vigor and ex vitro growth, a fact evidenced by the higher values obtained in relation to height and emission of new shoots and roots, as well as a greater fresh and dry biomass accumulation.

RESUMO Os bambus Guadua magna e G. angustifolia têm sido propagados vegetativamente quase que exclusivamente por técnicas convencionais de propagação. Objetivou-se micropropagar, estimar a produção de mudas e analisar a fidelidade genética de G. magna e G. angustifolia por marcadores moleculares ISSR. Plantas matrizes de ambas as espécies foram cultivadas em casa-de-vegetação e pulverizadas ou não com fungicida. Em laboratório, microestacas foram desinfestadas e estabelecidas em meio MS com 3,0 mL L-1 de Plant Preservative Mixture (PPM®) e 1 mL L-1 de Carbendazin®. As brotações livres de contaminação foram multiplicadas em meio MS líquido ou semissólido com 3,0 mg L-1 de BAP, por cinco subcultivos. O enraizamento foi realizado em meio de MS1/2 líquido ou semissólido, acrescido de 3,0 mg L-1 de AIB. A aclimatização foi realizada em substrato comercial, em câmara de crescimento, sendo a fidelidade genética dos clones produzidos analisada por marcadores ISSR. A adição de fungicida e PPM® ao meio reduziu a contaminação em G. magna, mas não em G. angustifolia. O meio líquido foi mais eficiente que o semissólido para multiplicação das espécies, as quais mostraram potenciais de produção entre 760 e 920 plantas por microestaca inicial, após cinco subcultivos. Plantas enraizadas apresentaram sobrevivência de até 100 % na aclimatização. Não foram observadas regiões polimórficas nos clones analisados por ISSR ao final do quinto subcultivo, sugerindo que a micropropagação é uma técnica segura para a multiplicação de bambus em larga escala.

ABSTRACT The bamboo species Guadua magna and G. angustifolia have been propagated nearly exclusively by conventional techniques of vegetative propagation. Micropropagation is a promising technique and an alternative to conventional ones. This study aimed to micropropagate plants, estimate the plantlets production and analyze the genetic fidelity of G. magna and G. angustifolia by ISSR molecular markers. Mother plants of both species were cultivated in a greenhouse, and either sprayed or not with fungicide. In the laboratory, microcuttings were disinfested and established in MS culture medium with 3.0 mL L-1 of Plant Preservative Mixture (PPM®) and 1 mL L-1 of Carbendazin®. The contamination-free shoots were multiplied in liquid or semi-solid MS medium with 3.0 mg L-1 of BAP for five subcultures. Rooting was performed in liquid or semi-solid MS1/2 medium, plus 3.0 mg L-1 of IBA. Acclimatization was performed on a commercial substrate, in a growth chamber, and the genetic fidelity of the clones produced was analyzed via ISSR markers. The addition of fungicide and PPM® to the medium reduced the contamination in G. magna, but not in G. angustifolia. The liquid medium was more efficient than the semi-solid one for the multiplication of both species, which showed production potentials between 760 and 920 plants per initial microcutting, after five subcultures. Rooted plants exhibited a survival rate of up to 100 % in acclimatization. No polymorphic regions were found in the clones analyzed by ISSR at the end of the fifth subculture, suggesting that micropropagation is a safe technique for the large-scale multiplication of bamboos.

Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a micropropagação de cultivares de amoreira-preta (Rubus spp.), após a conservação in vitro em condições de crescimento mínimo. Segmentos nodais dos genótipos 'Guarani', 'Caingangue', 'Ébano' and 'Xavante' foram conservados sob crescimento mínimo à temperatura de 20ºC, por 15 meses. Os microbrotos foram regenerados e multiplicados por até cinco subcultivos sucessivos, quando então foram enraizados e aclimatizados. Após 30 dias de aclimatização em casa de vegetação, as plantas enraizadas não apresentaram perdas significativas. As cultivares de amoreira-preta podem ser conservadas in vitro por 15 meses, sem subcultivos e, após esse período, podem ser micropropagadas em larga escala, mantendo-se o potencial regenerativo e a multiplicação.

Abstract: The objective of this work was to evaluate the micropropagation of blackberry (Rubus spp.) cultivars, after in vitro conservation under minimal growth conditions. Nodal segments of the 'Guarani', 'Caingangue', 'Ébano', and 'Xavante' genotypes were conserved under minimal growth conditions at 20ºC, for 15 months. Microshoots were regenerated and multiplied by up to five successive subcultures, when they were rooted and acclimatized. After 30 days of acclimatization in a greenhouse, rooted plantlets showed no significant losses. Blackberry cultivars can be conserved in vitro for 15 months, without subcultures and, after this time, they can be micropropagated on a large-scale, maintaining the regenerative potential and multiplication.

RESUMO O objetivo do trabalho foi caracterizar bioquimicamente bactérias sistêmicas isoladas de plantas de bananeiras, avaliar a sensibilidade das bactérias a antibióticos e determinar a fitotoxicidade de brotos de bananeiras durante a proliferação in vitro. Bactérias sistêmicas pertencentes aos gêneros Klebsiella e Aeromonas foram isoladas a partir das variedades "Maravilha" (FHIA 01 AAAB), "Preciosa" (PV 4285 AAAB) e "Thap Maeo" (AAB), sendo em seguida caracterizadas. Testes de sensibilidade das brotações aos antibióticos foram desenvolvidos e a mínima concentração inibitória (MIC) e os efeitos fitotóxicos dos antibióticos selecionados em relação aos brotos foram determinados. Entre os 20 antibióticos avaliados, verificou-se que as bactérias mostraram sensibilidade para o cefaclor, cefalexina, cefalotina, ácido nalidíxico, cloranfenicol e vancomicina. Entretanto, durante a determinação da MIC os melhores resultados foram obtidos com cefaclor, vancomicina e ácido nalidixico em concentrações entre 512 a 1.024 mg L-1. Em meio de cultura, o cefaclor na concentração de 1.024 mg L-1 foi o único a afetar a multiplicação e a sobrevivência de brotos em cultivo.

ABSTRACT The objective of this work was to characterize the biochemically systemic bacterial isolated from banana plants, to evaluate the bacterial sensitivity to antibiotics, and to determine the phytotoxicity of banana shoots during in vitro proliferation. Systemic bacteria belonging to the Klebsiella and Aeromonas genera were isolated from the "Maravilha" (FHIA 01 AAAB), "Preciosa" (PV 4285 AAAB) and "Thap Maeo" (AAB) varieties and were then characterized. Tests of shoot sensitivity to antibiotics were performed, and the minimum inhibitory concentration (MIC) and phytotoxic effects of selected antibiotics to plants were determined. Among the 20 antibiotics evaluated, the strains showed sensitivity to cefaclor, cefalexin, cefalotin, nalidixic acid, chloramphenicol, and vancomycin. However, during MIC determination, the best results were obtained with cefaclor, vancomycin or nalidixic acid alone in concentrations ranging from 512 to 1,024 mg L-1. In culture medium, cefaclor at 1,024 mg L-1 was the only antibiotic to affect the multiplication and the shoot survival in culture.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a manutenção in vitro de acessos de óleo de palma (Elaeis guineenses e E. oleifera) sob condições de crescimento lento. Plantas produzidas pelo resgate de embriões foram submetidas ao meio de cultura 1/2MS, acrescido dos carboidratos sacarose, manitol e sorbitol nas concentrações de 1, 2 e 3%, em 20 e 25±2ºC. Após 12 meses, a temperatura de 20°C retardou o crescimento das plantas. A sacarose é o carboidrato mais adequado para a manutenção da qualidade das plantas, enquanto o manitol e o sorbitol resultam em menor sobrevivência das plantas.

The objective of this work was to evaluate the in vitro maintenance of oil palm (Elaeis guineensis and E. oleifera) accessions under slow-growth conditions. Plants produced by embryo rescue were subject to 1/2MS culture medium supplemented with the carbohydrates sucrose, mannitol, and sorbitol at 1, 2, and 3% under 20 and 25±2ºC. After 12 months, the temperature of 20°C reduced plant growth. Sucrose is the most appropriate carbohydrate for maintaining the quality of the plants, whereas mannitol and sorbitol result in a reduced plant survival.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a diversidade morfológica de sementes de palma de óleo e agrupar os acessos de acordo com as suas características morfológicas. Foram avaliados 41 acessos do banco de germoplasma de palma de óleo da Embrapa Amazônia Ocidental - 18 de Elaeis oleifera e 23 de E. guineensis. Os agrupamentos foram formados com base em características morfológicas, por meio de análise de componentes principais. Em E. oleifera, foram formados quatro grupos ligados às suas regiões de origem, mas com diferenças morfológicas significativas entre acessos de uma mesma população. Para sementes de E. guineensis do tipo tenera, foram formados três grupos bastante divergentes, especialmente quanto aos parâmetros externos, os quais os diferenciaram dos demais. O parâmetro espessura do endocarpo se destacou na diferenciação intra e interpopulacional. Para E. guineensis do tipo dura, houve a formação de três grupos, com sementes maiores e endocarpos mais espessos, que diferiram dos demais. A variabilidade observada para as características das sementes, nos acessos analisados, permite estabelecer grupos divergentes, para definição de estratégias de melhoramento genético.

The objective of this work was to evaluate the morphological diversity of oil palm seeds and to cluster the accessions according to their morphological characteristics. Forty-one accessions from the oil palm germplasm bank of Embrapa Amazônia Ocidental were evaluated - 18 of Elaeis oleifera and 23 of E. guineensis. The groups were formed based on morphological characteristics, by principal component analysis. In E. oleifera, four groups were formed, tied to their region of origin, but with significant morphological differences between accessions from the same population. For tenera-type E. guineensis seeds, three widely divergent groups were formed, especially as to external parameters, which differentiated them from the other ones. The parameter endocarp thickness stood out in intra- and inter-population differentiation. For dura-type E. guineensis, three groups were formed, with larger seeds and thicker endocarps, which differed from all the other ones. The variability observed for seed characteristics in the analyzed accessions allows the establishment of different groups, to define strategies for genetic improvement.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a fitotoxicidade da solução de vitrificação de plantas (PVS2) e a sobrevivência de ápices caulinares de cana-de-açúcar, variedade SP716949, após criopreservação por "droplet-vitrification". Ápices caulinares foram pré-cultivados por 24 horas em meio MS com sacarose a 0,3 mol L-1 e expostos por 0, 20 ou 30 min a PVS2. Em seguida, os ápices foram mergulhados em nitrogênio líquido. O descongelamento em solução concentrada de sacarose (1,2 mol L-1) foi rápido. A PVS2 não tem efeito tóxico aos ápices que, no entanto, são sensíveis ao nitrogênio líquido. O melhor resultado ocorreu, quando os ápices foram mantidos por 20 min na solução PVS2, antes do congelamento, com 20% de sobrevivência.

The objective of this work was to evaluate the phytotoxicity of a plant vitrification solution (PVS2), and the survival of shoot tips of the sugarcane variety SP716949, after cryopreservation by droplet-vitrification. Shoot tips were precultured for 24 hours in MS medium containing 0.3 mol L-1 sucrose, and exposed to PVS2 for 0, 20 or 30 min. Shoot tips were then immersed in liquid nitrogen. Thawing was fast in concentrated sucrose solution (1.2 mol L-1). PVS2 is a nontoxic to shoot tips, which in turn are sensitive to liquid nitrogen. The best results occurred when shoot tips were maintained for up to 20 min in PVS2 solution, before freezing, with 20% survival.

RESUMO A cerejeira (Amburana acreana (Ducke) A.C. Smith) é uma espécie arbórea nativa da Amazônia Sul- Ocidental de grande importância madeireira, no entanto, encontra-se ameaçada de extinção. A propagação por cultura de tecidos desta espécie é de grande importância devido às dificuldades de coleta de sementes. Os objetivos deste trabalho foram avaliar a germinação in vitro e estabelecer protocolos para multiplicação e enraizamento in vitro de brotos de cerejeira. Para a germinação in vitro foram avaliadas diferentes concentrações salinas do meio MS e WPM (Woody Plant Medium). Foram utilizados segmentos nodais de plântulas germinadas in vitro para a multiplicação de brotos, onde se testaram diferentes concentrações de BAP (0; 0,25; 0,5; 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 mg.L-1) combinadas com ANA (0,1 mg.L-1). O enraizamento in vitro foi induzido com meio WPM/2, acrescido de 0,2 mg.L-1 de carvão ativado, suplementado com diferentes concentrações de AIB (0; 0,5; 1,0; 2,0 mg.L-1). O maior percentual de germinação in vitro foi obtido com o meio MS/2. A formação do maior número de brotos ocorreu com a concentração de BAP de 4,0 mg.L-1. A formação do maior número de raízes ocorreu com 0,5 mg.L-1 de AIB. As plântulas foram aclimatizadas em casa de vegetação com percentual de 54% de sobrevivência. A propagação in vitro da cerejeira é uma tecnologia viável para a produção de mudas apesar das dificuldades na sobrevivência de plantas em casa de vegetação.

ABSTRACT Cerejeira (Amburana acreana) is a woody native tree species from south-western Amazon Region of a great importance and endangered. The propagation by tissue culture of this species is of a great importance because the difficulties of its seed collection. The purpose of this study was to evaluate the in vitro germination and to establish a protocol for in vitro multiplication and rooting. For in vitro germination, the salt concentrations of MS and WPM (Woody Plant Medium) were evaluated. For in vitro multiplication of shoots it was used nodal segments of in vitro seedlings. The propagation media were composed of WPM salts, supplemented with different BAP concentrations (0, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0, 4.0, 8.0 mg.L-1) and 0.1 mg L-1 of NAA. The in vitro rooting was induced in half strength WPM salts, plus 0.2 mg L-1 activated charcoal and supplemented with different IBA concentrations (0, 0.5, 1.0, 2.0 mg.L- 1). The highest percentage of in vitro germination was obtained in the MS/2 medium. The formation of largest number of shoots occurred with 4.0 mg L-1 BAP. The formation of a greater number of roots occurred with 0.5 mg L-1 of IBA. The plantlets were air-conditioned in a greenhouse with 54% of survival rate. The in vitro propagation of Cerejeira is a viable technology for the production of seedlings in spite of the difficulties in the survival of plants in the greenhouse.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a propagação em larga escala de genótipos de videira após curto período de conservação in vitro. Foram utilizados microbrotos de dez genótipos de videira. As seguintes temperaturas de conservação foram avaliadas: 10, 20 e 25°C. Após o curto período de conservação, as brotações foram multiplicadas, por até cinco subcultivos sucessivos, para avaliar o potencial propagativo em larga escala do germoplasma mantido sob condições de crescimento mínimo. As brotações regeneradas foram enraizadas em diferentes concentrações de ácido indolbutírico (AIB) e aclimatizadas em casa de vegetação. A melhor temperatura para a conservação de curto prazo in vitro e para a sobrevivência dos genótipos foi a de 20°C. Na fase de multiplicação, o maior número de brotos foi verificado nos subcultivos 4 e 5, com médias de 4,9 e 4,8 brotos por explante, respectivamente. Na etapa de enraizamento, os melhores resultados para número de raízes foram obtidos em meio de cultura suplementado com 0,4 µmol L-1 de AIB, com média de três raízes por brotação. Durante a aclimatização, obteve-se índice de sobrevivência superior a 95%, após 30 dias de permanência em casa de vegetação. Genótipos de videira em conservação por seis meses in vitro, a 20ºC, podem ser micropropagados em larga escala.

The objective of this work was to evaluate the large-scale propagation of grapevine genotypes after short-term storage in vitro. Microshoots from ten grapevine genotypes were used. The following storage temperatures were evaluated: 10, 20, and 25°C. After short-term storage, the shoots were propagated in up to five successive subcultures, to assess the large-scale propagation of the germplasm maintained under conditions of minimal growth. The propagated shoots were rooted in different concentrations of indolbutiric acid (IBA) and acclimatized in greenhouse. The best temperature for short-term storage in vitro and survival of the genotypes was 20°C. In the propagation phase, the highest number of shoots per explant was found in the subcultures 4 and 5, with averages of 4.9 and 4.8 shoots per explant, respectively. In the rooting phase, the best results for number of roots were obtained using a culture medium supplemented with 0.4 µmol L-1 of IBA, with an average of three roots per shoot. During the acclimation phase, a survival rate higher than 95% was achieved after 30 days in the greenhouse. Grapevine genotypes maintained for six months in vitro, at 20ºC, can be micropropagated in large scale.

Altos custos de produção geralmente limitam o uso comercial da micropropagação. O uso de meios de cultura líquidos é considerado uma solução para a automação e redução de custos. Entretanto, dependendo da cultivar de bananeira, esse processo pode mostrar diferentes níveis de dificuldade, e adaptações nos protocolos são necessárias. Neste estudo, experimentos de diferenciação celular e regeneração de plantas foram desenvolvidos em células em suspensão de banana pela avaliação da densidade inicial de células, meios de cultura e sistemas de imersão temporária. Para tanto, uma sequência de três experimentos foi realizada: o primeiro avaliou os efeitos da densidade celular (0,5; 1 e 2 mL), meios de cultura (M1: 1/2MS, 0,1 g.L-1 de ácido ascórbico, 0,1 g.L-1 de L-prolina, 30 g.L-1 de sacarose e 10 µM de 2iP; M2: MS, 30 g.L-1 de sacarose, 2,2 µM de BAP e 11,4 µM de AIA) e períodos de diferenciação celular (40 e 130 dias); o segundo experimento analisou o efeito do tamanho dos propágulos diferenciados em meio líquido (aprox. 2,5; 5 e 10 mm em diâmetro) na formação de embriões somáticos ou na regeneração de plantas; finalmente, um terceiro experimento avaliou o efeito de sistemas de cultivo com papel-filtro cobrindo o meio de cultura semissólido e sistemas de imersão temporários na diferenciação dos propágulos e na regeneração de plantas. Não foram observadas diferenças significativas entre os meios de diferenciação, porém as melhores diluições de células para a diferenciação foram de 1 e 2 mL/30mL de meio de cultura, enquanto diluições de 0,5 mL/30 mL de meio aumentaram a oxidação celular. A extensão do período de diferenciação de 40 para 130 dias foi importante para produzir maior número de calos/propágulos uniformes e com pelo menos de 10 mm de diâmetro, que puderam ser usados em sistemas de imersão temporária (biorreatores) para a diferenciação de embriões somáticos e regeneração de plantas. Considerando todos os sistemas de regeneração, verificou-se que o uso de meios de regeneração de consistência semissólida com papel-filtro na superfície do meio é o mais responsivo para a diferenciação de embriões somáticos e regeneração de plantas.

High production costs generally limit the commercial use of the in vitro micropropagation. The use of liquid media is considered to be the ideal solution for the automation and the production costs reduction. However, depending on the variety, this process can show different levels of difficulty and adaptations in protocols are needed. In this study experiments on cell differentiation and plant regeneration were carried out from banana cell suspension culture, by evaluating the initial cell density, the culture media and the temporary immersion systems. A sequence of three experiments was performed: the first one evaluated the effects of cell density (0.5; 1 and 2), culture media (M1: 1/2MS, 100 g.L-1 ascorbic acid, 100 mg.L-1 L-proline, 30 g.L-1 sucrose and 10 µM 2iP; M2: MS, 30 g.L-1 sucrose, 2,2 µM BA and 11,4 µM IAA) and the period of cells differentiation (40 and 130 days). The second one analyzed the effect of propagules size differentiated in liquid media (approx. 2.5; 5 and 10 mm diameter) on somatic embryo formation or plant regeneration. Finally, a third experiment analyzed the effects of culture systems with filter-paper-covered medium and temporary immersion systems, on propagules differentiation or plant regeneration. The results showed that no differences were found between both differentiation media, and the better cells densities for differentiation were 1 ml and 2 mL/30 mL medium, whereas dilutions of 2 mL/30 mL medium increased cell oxidation. Extending the period in the differentiation medium from 40 to 130 days was important to produce a higher number of uniform embryogenic propagules with 10 mm diameter, which can be used in temporary immersion systems (bioreactors) for embryo and plant regeneration. Considering all the regeneration systems, the semi-solid regeneration medium covered by filter-paper significantly increased the somatic embryo differentiation and plants regeneration.

Inflorescências masculinas de bananeiras apresentam potencial para serem usadas como explantes para a micropropagação de bananeiras. Este trabalho teve por objetivo avaliar a influência genotípica e clonal de bananeiras micropropagadas a partir de gemas florais masculinas em sucessivos subcultivos. Foram utilizados explantes florais de 15 clones plantados em campo, da variedade Preciosa e do híbrido FHIA 02, em meio de cultura de MS contendo 4,0 mg.L-1 de BAP. Por sete subcultivos sucessivos de 30 dias, os materiais foram avaliados quanto à taxa de multiplicação e contaminação microbiana. Ao final do período de multiplicação, o acúmulo de mudas produzidas, em razão dos sucessivos subcultivos utilizando esse tipo de explante, foi também avaliado. Verificou-se que os maiores índices de contaminação foram observados no primeiro subcultivo, com média superior a 50% de contaminação dos explantes. As melhores taxas de multiplicação foram alcançadas no terceiro subcultivo, com média de até 6,1 brotos por explante. Os clones que apresentaram maior acúmulo de mudas produziram 105 e 163 mudas por explante, para a variedade Preciosa e o híbrido FHIA 2, respectivamente, após sete subcultivos.

Male inflorescences have potential to be used as explants for rapid micropropagation of banana. This work aimed to evaluate the influence of genotypes and clones of banana plants micropropagated from male floral buds in successive subcultures. Male inflorescences of 15 clones, of plants in the field from variety Preciosa and the hybrid FHIA 02 onto MS medium which was supplemented with 4.0 mg.L-1 BAP, were used. The number of shoots and the microbial contamination were evaluated for seven subcultures of 30 days. At the end of multiplication the total number of plantlets produced was also evaluated. It was verified that the higher rates of microbial contamination occurred in the first month of cultivation, with rates of more than 50% of explants contaminated. The best multiplication rates were achieved in the third subculture where up to 6.1 shoots per explant were obtained. The clones that presented the higher plantlets accumulation at the end of the multiplication period, produced 105 and 163 plantlets per explant for Preciosa and FHIA 02, respectively, after seven subcultures.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial germinativo e caracterizar morfoanatomicamente a estrutura foliar de plântulas de pinhão-manso originadas de germoplasma criopreservado. Inicialmente, as sementes foram avaliadas quanto à dessecação, a cada 24 horas, por até 120 horas. Posteriormente, as sementes foram dessecadas por 0, 24 e 48 horas e avaliadas mensalmente quanto ao potencial germinativo, antes e após armazenamento em nitrogênio líquido por imersão direta e congelamento rápido. Para caracterizar a viabilidade das sementes que não germinaram após o período de avaliação, os embriões zigóticos foram imersos em solução de tetrazólio. A morfoanatomia foliar após criopreservação foi caracterizada por meio de estudos histológicos. As sementes de pinhão-manso toleraram a dessecação a níveis críticos e a criopreservação com umidade em torno de 8%. A dessecação das sementes até valores baixos, associada a períodos prolongados de exposição ao nitrogênio líquido, causa anormalidade de plântulas, danifica as células e os tecidos das folhas, e afeta negativamente a germinação.

The objective of this work was to evaluate the germinative potential and the morphoanatomical features of leaves in seedlings of physic nut from cryopreserved germplasm. Initially, seeds were evaluated regarding desiccation every 24 hours for up to 120 hours. Then, seeds were desiccated for 0, 24, and 48 hours, and evaluated monthly as to germinative potential, before and after storage in liquid nitrogen by direct immersion and fast freezing. To characterize the viability of seeds that did not germinate after the evaluation period, the zygotic embryos were immersed in tetrazolium solution. Morphoanatomical features of leaves were determined after cryopreservation by histological evaluation. Physic nut seeds tolerated desiccation to critical levels and cryopreservation with moisture content around 8%. Seed desiccation to lower values, associated with longer periods of exposition to liquid nitrogen, causes abnormalities in seedlings, damages leaf cells and tissues, and affects negatively germination.

O objetivo deste trabalho foi avaliar a conservação in vitro de Piper aduncum e P. hispidinervum, em condições de crescimento lento. Os brotos foram armazenados a baixas temperaturas (10, 20 e 25ºC), e o meio de cultura foi suplementado com agentes osmóticos (sucrose e manitol - a 1, 2 e 3%) e ácido abcísico - ABA (0, 0,5, 1,0, 2,0 e 3,0 mg L-1). Após seis meses de armazenamentos os brotos foram avaliados quanto à sobrevivência e à rebrotação. A baixa temperatura de 20ºC foi efetiva para a conservação in vitro de brotos de P. aduncum e P. hispidinervum. Culturas in vitro, mantidas a 20ºC em meio MS apresentaram 100% de sobrevivência com o crescimento lento dos brotos. A presença de manitol ou ABA, no meio de cultura, afetou negativamente o crescimento de brotos, o que foi evidenciado pelo baixo índice de sobrevivência dos brotos.

The objective of this work was to evaluate in vitro storage of Piper aduncum and P. hispidinervum under slow-growth conditions. Shoots were stored at low temperatures (10, 20 and 25°C), and the culture medium was supplemented with osmotic agents (sucrose and mannitol - at 1, 2 and 3%) and abiscisic acid - ABA (0, 0.5, 1.0, 2.0 and 3.0 mg L-1). After six-months of storage, shoots were evaluated for survival and regrowth. Low temperature at 20ºC was effective for the in vitro conservation of P. aduncum and P. hispidinervum shoots. In vitro cultures maintained at 20ºC on MS medium showed 100% survival with slow-growth shoots. The presence of mannitol or ABA, in the culture medium, negatively affected shoot growth, which is evidenced by the low rate of recovered shoots.